단백질 실험노트 - 상

제4판 발행에 즈음하여
초판 서론

제1장 단백질 시험의 진행방법
Ⅰ-1 기본적인 실험의 흐름
Ⅰ-2 단백질 실험의 주요점

제2장 단백질의 기본적인 실험조작
Ⅰ) Buffer 조제법
Ⅰ-1 Buffer 선택
Ⅰ-2 Buffer의 조제 사례

Ⅱ) 단백질의 안정화
Ⅱ-1 단백질의 구조
Ⅱ-2 안정화 시약

Ⅲ) 단백질의 정량법
Ⅲ-1 UV법(280mm)
Ⅲ-2 Biuret법
Ⅲ-3 Lowry법
Ⅲ-4 BCA법
Ⅲ-5 Bradford법

제3장 단백질 추출법
Ⅰ) 세포의 파쇄와 분획
Ⅰ-1 동물조직
Ⅰ-2 배양세포
Ⅰ-3 효모
Ⅰ-4 식물

Ⅱ) 단백질의 가용화법
Ⅱ-1 생체막 성분의 분리
Ⅱ-2 막단백질의 수용화

제4장 단백질의 분리정제법
Ⅰ) 정제 과정의 구성
Ⅰ-1 정제를 시작하기 전에
Ⅰ-2 정제의 진행방법

Ⅱ) 황산암모늄 분획, 농축, 탈염 조작
Ⅱ-1 황산암모늄 침전법
Ⅱ-2 유기용매와 산을 이용한 단백질의 침전 농축
Ⅱ-3 막농축
Ⅱ-4 기타 농축법
Ⅱ-5 투석

Ⅲ) 저압 chromatography의 기본적 실험과정
Ⅲ-1 연질 담체의 종류
Ⅲ-2 피룡한 장치와 기구
Ⅲ-3 실험과정

Ⅳ) 중고압 액체 chromatography의 기본 실험과정(FPLC, HPLC 등의 이용)
Ⅳ-1 시스템에 필요한 기계류
Ⅳ-2 실험과정

Ⅴ) 이온교환 chromatography
Ⅴ-1 이온교환 chromatography의 원리
Ⅴ-2 실험조건
Ⅴ-3 음이온 교환 HPLC의 실험 사례 - Laminin 332의 정제
Ⅴ-4 연질 gel 이온교환 chromatography
Ⅴ-5 기타

Ⅵ) Gel 여과 chromatography
Ⅵ-1 원리와 특징
Ⅵ-2 실험조건
Ⅵ-3 Sepharose 4B를 이용한 gel 여과 chromatography - Laminin 332의 정제에 응용
Ⅵ-4 Superdex coiumn을 이용한 gel 여과 HPLC
Ⅵ-5 Gel 여과에 의한 탈염

Ⅶ) Affinity chromatography
Ⅶ-1 중요한 실험조건
Ⅶ-2 Trypsin affinity chromatography
Ⅶ-3 기타 chromatography

Ⅷ) 역상 chromatography
Ⅷ-1 중요한 실험조건
Ⅷ-2 실험조작

제5장 유전자 재조합 단백질의 발현과 정제
Ⅰ) 대장균에 의한 융합단백질의 발현과 정제
Ⅰ-1 His-tag 단백질의 발현과 정제
Ⅰ-2 GST 융합단백질의 발현과 정제
Ⅰ-3 그 밖의 tagㆍ융합단백질ㆍ형광단백질과 tag 제거용 protease
Ⅰ-4 봉입체로부터의 활성재생법
Ⅰ-5 Arginine에 의한 재조합 단백질의 재생방법 원리ㆍ실험법의 개요, 목적

Ⅱ) 동물세포에서의 유전자 재조합 단백질의 발현
Ⅱ-1 발현계의 설계와 도입
Ⅱ-2 Retrovirus에 의한 유전자도입 사례
Ⅱ-3 기타

Ⅲ) 무세포 단백질 합성계
Ⅲ-1 무세포 단백질 합성계의 개요와 이점
Ⅲ-2 PURESYSTEM kit를 이용한 단백질의 합성ㆍ정제

Ⅳ) 고차구조 분석을 위한 단백질의 준비
Ⅳ-1 X선 결정구조 분석을 위한 단백질 준비법
Ⅳ-2 NMR 분석을 위한 단백질 준비법

● 본서에 언급된 시약, buffer, 배지의 목록
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