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책 정보
· 분류 : 국내도서 > 대학교재/전문서적 > 자연과학계열 > 생물학
· ISBN : 9788975995033
· 쪽수 : 235쪽
책 소개
목차
클로닝의 정의 21
새로운 유전자의 발굴 22
과거의 클로닝 24
현재의 클로닝 25
cDNA library 28
RACE(Rapid Amplification of CDNA Ends) 30
클로닝 설계에 유용한 소프트웨어 33
Vector, plasmid ＆ construct 36
제한효소 (Restriction Enzyme; RE) 39
Multiple Cloning Sites(MCS) 45
새로운 plasmid를 받았을 때 47
Cut ＆ Paste 49
LB plate 만들기 62
Star activity 65
Competent cells 67
Fill-in(Full ＆ Partial) 71
Compatible cohesive ends 75
Methylation 77
Agarose gel electrophoresis for nucleic acids 86
Three-piece ligation 91
PCR 94
Site-directed mutagenesis 101
유전자 중간부분에 삽입하는 방법(Insertion) 107
유전자의 중간부분을 삭제하는 방법(Deletion) 110
유전자의 처음이나 끝에 epitope tag을 삽입하는 방법 112
DNA의 질량을 molar 농도로 바꾸는 법 116
TA cloning 117
T vector의 제작 121
TOPO TA cloning 124
Gateway cloning 127
Translational Fusion Vs. Transcriptional Fusion 130
BAC recombineering 133
DNA sequencing 137
다른 종에서 유사한 유전자를 클로닝하는 방법 139
Old trick: partial digestion 142
클로닝이 다 됐다고 생각했는데, frame shift가 있을 때 144
클로닝의 실제: 억세게 운이 없는 경우 146
벡터의 변경 157
Nested PCR 160
In-Fusion Sequence-and Ligation-independent Cloning (In-Fusion SLIC) 164
T4 DNA Polymerase Sequence-and Ligation-independent Cloning 178
(T4 DNA Pol SLIC) 178
Golden gate assembly 183
Golden gate를 이용해 푸는 직소퍼즐 189
(Jigsaw puzzle) 189
너의 목소리가 들려 (Kozak sequence) 193
식물 형질 전환 (Plant transformation) 195
벡터의 구조 195
Rhizobioum radiobacter 형질 전환 199
애기장대 원형질체를 이용한 일과성 발현 분석 (A transient expression assay using Arabidopsis mesophyll protoplasts) 201
클로닝이 안될 때 208
클로닝의 정리와 기록 210
심화학습을 위한 문헌 214
약자 216
Figure legends 228
Index 234
책속에서
우리가 실험실에서 쓰는 “클로닝(cloning)”이라는 용어는, 쓰는 사람에 따라서 그 의미가 다르다. 하지만 이 책에서는 주로 유전자를 옮기거나 변형시키는 것을 다룰 것이고, 새로운 유전자를 발굴하는 작업도 일부 언급할 것이다.
